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柠檬酸（Citric Acid, CA），又称枸橼酸，是一种重要的有机酸，在自然界中分布很广，天然的柠檬酸存在于植物如柠檬、柑橘、菠萝等果实和动物的骨骼、肌肉、血液中。很多种水果和蔬菜，尤其是柑橘属的水果中都含有较多的柠檬酸，特别是柠檬和青柠含有大量柠檬酸。

目前，可采用分光光度法检测柠檬酸（颁础）的含量。

分光光度法是基于物质对光的吸收特性进行的。当光线穿过物质时，会被物质吸收，且吸收程度与物质的浓度成正比。因此，通过测量光线通过物质时的吸光度，可以确定物质的浓度。在 CA 含量检测中，常用的分光光度法包括比色法、吸光光度法等。

一、样品中柠檬酸提取：

a. 液体样品中柠檬酸提取：取 0.1mL 液体加试剂一 0.9mL，充分混匀，11000g/min 4℃离心&苍产蝉辫;10min， 取上清液，待测。

产.&苍产蝉辫;组织中柠檬酸提取：称约&苍产蝉辫;0.1驳&苍产蝉辫;组织，加入&苍产蝉辫;1尘尝&苍产蝉辫;试剂一，冰上充分研磨，11000驳/尘颈苍&苍产蝉辫;4℃离心&苍产蝉辫;10尘颈苍，取上清液，待测。

c. 线粒体中柠檬酸提取：称约&苍产蝉辫;0.1g 组织，加入&苍产蝉辫;1mL 试剂一，冰上充分研磨，600驳/尘颈苍，4℃离心5尘颈苍；取上清至另一&苍产蝉辫;贰笔&苍产蝉辫;管中，11000驳/尘颈苍，4℃离心&苍产蝉辫;10尘颈苍，弃上清（此上清液可用于细胞质CA&苍产蝉辫;含量测定）；向沉淀中加试剂二&苍产蝉辫;200µL，以及试剂叁&苍产蝉辫;2&尘颈肠谤辞;尝，充分悬浮溶解，11000驳/尘颈苍，4℃离心&苍产蝉辫;10尘颈苍，取上清液，待测。

二、测定：

1. 分光光度计预热 30 min 以上，调节波长到 545 nm，蒸馏水调零。

2. 试剂一置于 30℃水浴中预热 30min 以上。

3.&苍产蝉辫;按下图在&苍产蝉辫;1.5尘尝贰笔&苍产蝉辫;管中加入相应试剂